產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
|
豬(zhū)霍(huò)亂沙(shā)門氏(shì)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Salmonella choleraesuisPCR |
YS-P014702 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保存,避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū):低溫(wēn),避光。
有效期:一(yī)年(nián)
貨期:現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年,這是指在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性,有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期,Ct值應小於等(děng)於35;
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一(yī)次實驗中同時滿足(zú),否則(zé)該次實驗視為無效。
2.可(kě)疑(yí):有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對於可疑樣(yàng)本建議復核(hé)一次,若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性,否(fǒu)則判定(dìng)為陰性;
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染,樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性結果;
2. 試劑運(yùn)輸,保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降,可能(néng)會導致出現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
②鹼基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
豬(zhū)霍亂沙門(mén)氏菌PCR檢測試劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合是關鍵。引物與模(mó)板的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特異性和保守性高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區,其特異性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的,能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞;在病(bìng)毒的檢測(cè)中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位);在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次(cì)性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加好後,即(jí)在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴鍋(guō)上進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應,一般(bān)在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析,不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù),無放(fàng)射(shè)性汙染,易推廣。
(4) 對標本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液,體腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽液,毛發(fā),細(xì)胞,活PCR技術概(gài)論(lùn)。
