產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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火(huǒ)雞沙(shā)門氏(shì)菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Salmonella meleagridisPCR |
YS-P014711 |
分類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效(xiào)期一(yī)般為1年，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好超過正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建議(yì)復核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染，試劑汙染，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確引起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應的(dí)忠實性；
④靶基因的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
火(huǒ)雞沙門氏(shì)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中引物(wù)與模板的正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合酶合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要求低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論。
