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PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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肯(kěn)塔基(jī)沙門氏(shì)菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Salmonella kentuckyPCR |
YS-P014710 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般為1年，這(zhè)是指在適當的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最高點。
【質控標準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次實驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸，保存不(bù)當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測(cè)效能下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異性與(yǔ)保守性。
肯塔(tǎ)基(jī)沙門(mén)氏菌PCR檢測(cè)試劑盒其中引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵。引物與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結合的(dí)特(tè)異性大大增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因區，其特異性(xìng)程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指數方式增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一(yī)般用電泳分(fēn)析，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無(wú)放射性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨床(chuáng)標本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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