產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
|
血(xiě)吸蟲通用PCR檢測試(shì)劑盒 |
Schistosoma spp.PCR |
YS-P014736 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年，這是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結果分析條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該(gāi)次實驗視(shì)為無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核一(yī)次，若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑(jì)配製不準確引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
血(xiě)吸(xī)蟲(chóng)通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可以在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性大大增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片段也(yě)就能保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個靶細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地將反應液加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行(háng)變性-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一定要(yào)用同位素，無放射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本(běn)如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論。
- 上一條(tiáo)：施馬倫(lún)貝格(gé)病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑盒
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