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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
塞(sāi)姆(mǔ)利(lì)基森林(lín)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
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2024-3-15 瀏(liú)覽次數：813
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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塞姆(mǔ)利基森(sēn)林(lín)病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Semliki Forest Virus(SFV)RTPCR |
YS-P014738 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增部分的試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核一(yī)次，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會出現假陽性結果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起的試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異(yì)性與保守性。
塞姆(mǔ)利基森林(lín)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中引(yǐn)物與模(mó)板的正確(què)結合是關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對原則(zé)的(dí)。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫度下(xià)進行，結合的特異(yì)性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持很高的(dí)正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特異(yì)性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
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