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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品屬性
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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新加坡(pō)石斑魚虹彩病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Singapore Grouper Iridovirus(SGIV)PCR |
YS-P014756 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián)，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下，產物檢測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好超(chāo)過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測結果應為陽性，有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求需在一次實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則該次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於可疑樣本建議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測(cè)效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
新(xīn)加(jiā)坡(pō)石斑魚虹彩病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合是關鍵。引物(wù)與模板的結合(hé)及(jí)引物鏈的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進行，結(jié)合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正(zhèng)確度。再通(tōng)過(guò)選擇特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以指數方式(shì)增(zēng)加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測模(mó)板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋上進行(háng)變性(xìng)-退火-延(yán)伸反應，一般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用同位素，無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要求低
不需(xū)要分離(lí)病毒或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
