產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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申(shēn)克孢子細(xì)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Sporothrix schenckiiPCR |
YS-P014759 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次實驗視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣本；對於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性，否則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引起的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能下降，可能會導致出現假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實性；
④靶基因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
申(shēn)克孢(bāo)子(zǐ)細(xì)菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與模板的正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結合(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異性程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位)；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低
不(bù)需要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
