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PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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鵝螺(luó)旋(xuán)體(tǐ)病PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
Spirocheta anserinaPCR |
YS-P014758 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一般(bān)為1年，這是指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核酸擴增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實驗視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復核一次，若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期，則判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配製不(bù)準確(què)引起的試劑(jì)檢測效能(néng)下降，可能會(huì)導致(zhì)出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性與保守(shǒu)性。
鵝螺旋(xuán)體病PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的(dí)結合及引物(wù)鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結合(hé)的特(tè)異性大大增加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能(néng)保持很高的正確(què)度。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在病毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地將反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如血液，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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