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PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
跗(fū)綫蟎(mǎn)屬(shǔ)通(tōng)用(yòng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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跗綫蟎屬(shǔ)通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Tarsonemus spp.PCR |
YS-P014822 |
分類:PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光保存,避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸:低溫,避光。
有(yǒu)效期(qī):一年(nián)
貨期(qī):現貨PCR試劑盒的(dí)有效期一般(bān)為1年,這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。

u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢測結(jié)果應為陽性,有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,Ct值應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以上(shàng)要求需在一次實(shí)驗中同時滿足(zú),否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn);對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復核一次,若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),則判(pàn)定為陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性;
3. 陰性(xìng):無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染,試(shì)劑汙染,樣品交叉(chā)汙染會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保(bǎo)存不(bù)當或試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng),可能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果。

②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng);
④靶基(jī)因的特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
跗(fū)綫(xiàn)蟎(mǎn)屬通(tōng)用(yòng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng),使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在較(jiào)高(gāo)的溫度下進行(háng),結合的特異性大大增(zēng)加,被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因片段也就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高的正確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區,其特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以(yǐ)指數方式增(zēng)加的(dí),能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞;在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位);在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶,一次性(xìng)地(dì)將反應液(yè)加好後(hòu),即在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一(yī)般在(zài)2~4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分析,不一定要用同位素(sù),無放射性汙染(rǎn),易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不需(xū)要分離病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液,體腔液,洗嗽液,毛發,細胞,活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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