產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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毛(máo)癬菌(jūn)通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Trichophyton spp.PCR |
YS-P014867 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為1年(nián)，這是指在適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢測(cè)部分試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定在剛(gāng)好超過(guò)正常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則該次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次，若復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙染會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性；
④靶基因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
毛(máo)癬菌通用PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模(mó)板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異性大大增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區，其(qí)特異性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中檢出(chū)一(yī)個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上進行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一般用(yòng)電泳分析，不(bù)一定要用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為擴增模板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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