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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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微(wēi)細(xì)毛(máo)圓綫蟲PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Trichostrongylus tenuisPCR |
YS-P014871 |
分類:PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件:-20℃避光保(bǎo)存,避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū):低(dī)溫(wēn),避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年,這是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下,產物檢測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融(róng)。

u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高點。
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性,有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時滿足,否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
2.可(kě)疑:有明顯的指數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn);對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次,若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,則判定為陽(yáng)性,否則(zé)判(pàn)定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染,試(shì)劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū),保存(cún)不當或試劑配製(zhì)不準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng),可能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。

②鹼基(jī)配對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的(dí)忠實性(xìng);
④靶基因的特(tè)異性與保守性。
微細毛(máo)圓綫(xiàn)蟲PCR檢測試劑盒(hé)其中引物(wù)與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引物(wù)的(dí)結合(復性)可以在較高(gāo)的溫度下進行(háng),結(jié)合的特異性(xìng)大大增加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區,其特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指數(shù)方式增加(jiā)的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞;在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位(wèi));在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸反應(yīng),一(yī)般在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī),不一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù),無(wú)放(fàng)射(shè)性汙(wū)染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模(mó)板。可直接用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血液(yè),體腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛(máo)發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術概論。
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