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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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透(tòu)明毛圓(yuán)綫(xiàn)蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Trichostrongylus vitrinusPCR |
YS-P014872 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在一(yī)次實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足，否則(zé)該次實(shí)驗視為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復核一(yī)次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且有指數擴(kuò)增期，則(zé)判定為陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保守性。
透(tòu)明(míng)毛圓綫(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物與模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合成(chéng)反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和(hé)保守性高的靶基因(yīn)區(qū)，其特異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是以指數方式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同位素(sù)，無(wú)放射性汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求低
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
