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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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化(huà)膿隱秘菌(jūn)原(yuán)名(míng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Truperella pyogenes(Corynebacterium pyogenes)PCR |
YS-P014880 |
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存(cún)溫度下。核酸擴增部分的試劑一般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛(gāng)好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結果應為陽性(xìng)，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要求需(xū)在一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期(qī)，則判定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不當或試劑配製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降，可(kě)能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
化(huà)膿隱(yǐn)秘菌(jūn)原名(míng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物與模板的(dí)正確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反應(yīng)中模板與引物(wù)的結合(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶基因片段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將反應液加好後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上進行變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電泳分(fēn)析，不一定要用同(tóng)位素，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求低
不需(xū)要分(fēn)離病毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論。
