產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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活(huó)動(dòng)錐蟲(chóng)PCR檢測試(shì)劑盒 |
Trypanosoma vivaxPCR |
YS-P014890 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結果應為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一次，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能下(xià)降，可能會(huì)導致(zhì)出現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性(xìng)。
活動(dòng)錐(zhuī)蟲PCR檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性大大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和保守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地將反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病毒或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論。
