產品中心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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火雞星(xīng)狀病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Turkey Astrovirus(TAstV)RTPCR |
YS-P014891 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期一般為1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以上要求需在一(yī)次實驗中同(tóng)時滿足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一次，若復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當或試劑(jì)配製(zhì)不準確引起的試劑檢測效能(néng)下降，可能會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
火雞星狀(zhuàng)病毒PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合及引物(wù)鏈的延伸是遵循鹼基配對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度下進行，結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過選擇(zé)特異性和保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測模板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地(dì)將反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分析(xī)，不一(yī)定要用(yòng)同位素(sù)，無放(fàng)射性汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求低
不(bù)需要分離(lí)病毒或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論。
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