產(chǎn)品中心
PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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天(tiān)花(huā)病毒PCR檢測試劑盒(hé) |
Variola Virus(VARV)PCR |
YS-P014899 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有效(xiào)期一般為1年(nián)，這是(shì)指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本；對(duì)於可(kě)疑樣本建議復(fù)核一次，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降，可能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
天(tiān)花(huā)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中引物(wù)與模板的正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行，結合的特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也就能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式增加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細菌及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
