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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒

豬(zhū)腸(cháng)道杯狀病毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒(hé)

文字(zì):[大(dà)][中(zhōng)][小] 2024-3-15    瀏(liú)覽次(cì)數(shù):710    
商(shāng)品(pǐn)屬性
產品名稱(chēng) 英文名稱 貨號
豬(zhū)腸道(dào)杯狀(zhuàng)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
Porcine Enteric Calicivirus(PECV)RTPCR
YS-P014611
規(guī)格(gé):50T
分類:PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保存(cún),避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū):低溫,避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一(yī)年

貨期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年,這是(shì)指在適當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià),產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融。

【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 基(jī)綫(xiàn)(Baseline)設(shè)定:應選擇該(gāi)次實(shí)驗(yàn)指數(shù)擴增(zēng)前(qián)所有(yǒu)樣本熒(yíng)光(guāng)信號比(bǐ)較穩(wěn)定的一(yī)段區(qū)域(所有(yǒu)樣(yàng)本熒光信(xìn)號(hào)無較大波動),起始點(Start)應避(bì)開熒光采(cǎi)集起(qǐ)始階(jiē)段的信(xìn)號波(bō)動,終止(zhǐ)點(diǎn)(End)應比最早出(chū)現指數擴增(zēng)的(dí)樣本(běn)Ct值減(jiǎn)少1~3個(gè)循環,建議(yì)基綫(xiàn)設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定在(zài)剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
1.   陰性質控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陰(yīn)性(xìng),無(wú)指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct;
2.   陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng),有明顯的(dí)指數擴增期(qī),Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35;
3.   以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一(yī)次實驗中同時滿足(zú),否則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
1.   陽性(xìng):有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期,且(qiě)Ct<38;
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本;對(duì)於(yú)可疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次,若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,則判(pàn)定為陽性,否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3.   陰(yīn)性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1.   實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙(wū)染,樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ);

2.   試劑(jì)運輸,保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑配製不(bù)準確引起的(dí)試(shì)劑檢測效能下降(jiàng),可能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰性(xìng)結果。

PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性:
   ①引物與(yǔ)模(mó)板DNA特異正確的(dí)結(jié)合;
   ②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則;
   ③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠實性(xìng);
   ④靶基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
豬腸(cháng)道杯狀病(bìng)毒PCR檢測試劑盒其中引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反應中模板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行(háng),結合(hé)的特(tè)異性大大(dà)增(zēng)加(jiā),被擴增的靶基因片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區,其特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是(shì)以指數(shù)方式(shì)增加的(dí),能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞;在(zài)病毒(dú)的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位(wèi));在細菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu),即在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應,一般(bān)在(zài)2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析(xī),不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素,無放射性(xìng)汙染,易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需要分離病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛發(fā),細胞,活PCR技術概(gài)論。
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