產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規(guī)格 | 貨(huò)號 |
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丙型(xíng)肝炎病(bìng)毒(dú)PCR基因分(fēn)型(xíng)測(cè)定試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P014956 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的試劑一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設(shè)定在剛好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次實驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對於(yú)可疑樣本(běn)建議復核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性與保守(shǒu)性。
丙型(xíng)肝炎病毒PCR基因分型(xíng)測定(dìng)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增的(dí)靶基(jī)因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很高的正確度。再通過選擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其(qí)特異性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量是以指數方式(shì)增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用電泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射性汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論。
