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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 規格(gé) | 貨號(hào) |
|
超級(jí)細(xì)菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P014971 |
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期一(yī)般為1年，這是指在適(shì)當的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定在剛(gāng)好超過(guò)正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對於可(kě)疑(yí)樣本建議復(fù)核一次(cì)，若復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽性，否則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確引起的(dí)試劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降，可能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
超級(jí)細菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合及(jí)引物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復性(xìng))可以在較高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結合的特異性大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量(liáng)是以指數方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增產物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一定要用同位素(sù)，無放射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需(xū)要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本如血液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
