產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號 |
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出血性(xìng)大腸杆菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P014972 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期一般為1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測部分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上要求需在(zài)一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
出(chū)血(xiě)性大腸(cháng)杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的正確結合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼基配對原則的(dí)。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大(dà)增加(jiā)，被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和保守性高的(dí)靶基因區，其特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般用(yòng)電泳分析，不(bù)一定要用(yòng)同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要分離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
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