產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨(huò)號 |
|
傳(chuán)染性(xìng)法氏(shì)囊病(bìng)病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P014973 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避免反復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期一般(bān)為1年，這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融。
【結果分析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣本(běn)建議復(fù)核一(yī)次，若復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能(néng)會導致出現假陰性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特異性與保守(shǒu)性。
傳(chuán)染(rǎn)性法(fǎ)氏(shì)囊病(bìng)病毒(dú)PCR檢測試劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的正確(què)結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶基(jī)因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生成(chéng)量是以指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出一個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用(yòng)同位素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板。可直接用臨床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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