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PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨(huò)號(hào) |
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大米(mǐ)BT基因(yīn)PCR檢測試劑盒 |
50T |
YS-P014992 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸擴增(zēng)部分的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在剛(gāng)好超(chāo)過正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測結果應為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復核一次(cì)，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則(zé)判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存(cún)不當(dāng)或試劑配(pèi)製不準確(què)引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性與(yǔ)保守性。
大米BT基因PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的正確結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被擴增的靶基(jī)因片(piàn)段也就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基因區(qū)，其特異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將反應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位素，無放射性汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板。可直接用臨床標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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