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PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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鉤(gōu)端(duān)螺(luó)旋體(tǐ)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015038 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試劑一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次實驗(yàn)視為無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定為陽性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染會出現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑配製不(bù)準確(què)引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性與(yǔ)保守性。
鉤端螺旋體PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)正確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的結合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基配對原則的。聚(jù)合酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使反應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特(tè)異性大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能保持很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要(yào)求低
不需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標本如血液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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