產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
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猴(hóu)痘病毒PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015047 |
儲(chǔ)存條件:-20℃避光(guāng)保存,避免反復凍融(róng)。
運輸:低溫,避光。
有效(xiào)期:一年
貨期:現貨PCR試(shì)劑盒的有效期一般為1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一般要貯存於(yú)-20℃下,產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。

u 閾值(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct值應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足,否則(zé)該次實驗視(shì)為無(wú)效。
2.可疑(yí):有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為可疑(yí)樣本(běn);對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議復核一次(cì),若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期,則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性,否則(zé)判定為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染(rǎn),試(shì)劑汙染,樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果;
2. 試劑(jì)運輸,保存不當或(huò)試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降,可能會導致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基因的特異性與保守性。
猴痘病毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物鏈的(dí)延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚合酶合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行,結合(hé)的(dí)特異性大大增加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基因(yīn)區,其(qí)特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量是以指數方式增加的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病(bìng)毒的檢測中(zhōng),PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶,一次性(xìng)地將反應液加(jiā)好後,即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應,一般在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素,無放射性汙(wū)染(rǎn),易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血液,體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽液,毛(máo)發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術概論。
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