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產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨(huò)號 |
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呼(hū)吸(xī)道病(bìng)毒多(duō)重(zhòng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015048 |
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低溫，避光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有效(xiào)期一般為(wéi)1年(nián)，這是指在適(shì)當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分的試(shì)劑一般要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測(cè)結果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判定為陽性(xìng)，否則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會出現假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保存不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
呼吸道病毒(dú)多重PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板(bǎn)的正確結合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片段也就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異性和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以指數(shù)方式增加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模板擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地將反(fǎn)應(yīng)液加好後，即在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用電泳(yǒng)分析(xī)，不一定要用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接用臨床(chuáng)標本(běn)如血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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