產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
|
脊髓延(yán)髓肌肉萎縮症(zhèng)PCR檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015065 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年，這是指在適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試劑一般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值應小於等於35；
3. 以上要求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則該(gāi)次(cì)實驗視為無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng)，否則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉(chā)汙染會(huì)出現假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可能會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
脊(jǐ)髓(suǐ)延(yán)髓肌肉(ròu)萎縮症PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中(zhōng)引物與模(mó)板的(dí)正確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶基因片段也就能保持(chí)很高的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過選擇特異性和保守性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應液加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸反應，一般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素，無放(fàng)射性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
