產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規格 | 貨號(hào) |
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芥(jiè)末PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015077 |
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保存,避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸:低溫,避(bì)光。
有效(xiào)期:一(yī)年
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為1年,這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般要貯存於-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍融(róng)。

u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果應為(wéi)陽性,有明顯(xiǎn)的指數擴增期,Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需在一次實(shí)驗中同時滿(mǎn)足(zú),否則該次實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
2.可疑:有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本(běn);對於可(kě)疑(yí)樣本建議(yì)復核一次,若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,則判定為陽(yáng)性,否則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙(wū)染,試劑汙染,樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果;
2. 試劑運(yùn)輸,保存不當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確引起的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能下降,可能(néng)會導致出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。

②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性(xìng);
④靶基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守性。
芥(jiè)末(mò)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與模板(bǎn)的正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進行(háng),結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加,被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度。再(zài)通過選擇特異性(xìng)和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因區(qū),其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的,能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在(zài)病毒的檢測(cè)中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位(wèi));在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退火-延伸反應,一(yī)般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析(xī),不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素,無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn),易推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純度要求低
不需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血液,體腔液,洗嗽液,毛(máo)發(fā),細(xì)胞(bāo),活PCR技術(shù)概論。
