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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨號(hào) |
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解脲(niào)支原體PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015076 |
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有效期一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於可疑樣本(běn)建議(yì)復核一(yī)次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不當或試劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
解脲支原體PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與模板的(dí)結合及引物(wù)鏈(liàn)的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度下進行，結(jié)合的(dí)特異性大大(dà)增(zēng)加，被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異性和保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用同位素，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低
不需要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論。
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