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產品(pǐn)中心
PCR檢測試劑(jì)盒
軍(jūn)團(tuán)菌S rRNA基(jī)因(yīn)(bp)常規PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬性
| 產品名稱 | 規格 | 貨號 |
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軍團(tuán)菌S rRNA基(jī)因(bp)常(cháng)規(guī)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015083 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指在(zài)適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試劑則貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建議復核一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當或(huò)試劑(jì)配製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降，可能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性與保守性。
軍(jūn)團菌S rRNA基(jī)因(bp)常規(guī)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵。引物與模板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對原則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性，使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度(dù)下進行(háng)，結合的(dí)特異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶基因(yīn)片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正確度。再通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成量是以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳分析，不一定要用(yòng)同位(wèi)素，無放射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需要分(fēn)離病毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直接用(yòng)臨(lín)床標本如血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
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