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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規(guī)格 | 貨(huò)號(hào) |
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流感(gǎn)病(bìng)毒甲型HN PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015108 |
儲存條件:-20℃避(bì)光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫,避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī):一(yī)年(nián)
貨(huò)期:現貨PCR試劑(jì)盒的有效期(qī)一般為1年(nián),這是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增部分的(dí)試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產物(wù)檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融。

u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾值綫設定(dìng)在剛好超(chāo)過正常陰性(xìng)質控品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性,有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於35;
3. 以上要求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú),否則(zé)該次實(shí)驗視為無(wú)效。
2.可疑:有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本;對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議復核一次(cì),若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期,則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否(fǒu)則判(pàn)定為陰性;
3. 陰(yīn)性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染(rǎn),試劑汙染,樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運輸(shū),保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能下降,可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結果。

②鹼(jiǎn)基配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng);
④靶基(jī)因的特異性與保守性(xìng)。
流感病毒甲型(xíng)HN PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)正確結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循(xún)鹼基配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng),使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的溫度下進行(háng),結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大(dà)增加,被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其特異性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的,能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo);在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi));在細菌學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後,即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應(yīng),一般(bān)在2~4 小時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一(yī)般(bān)用電泳分析(xī),不一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素,無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液,體腔液,洗(xǐ)嗽液,毛(máo)發(fā),細胞,活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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