產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
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牛肺炎支原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015153 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴增部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要貯存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好超過正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測(cè)結果應(yīng)為陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時滿足(zú)，否則該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣本建議復核一次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸(shū)，保存不當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
牛(niú)肺(fèi)炎(yán)支原體PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中引物(wù)與模板(bǎn)的正確(què)結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物與模板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引物的結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段也就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一定(dìng)要用同位素，無(wú)放射性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離(lí)病毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作(zuò)為擴增模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
