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PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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瘧(nüè)原蟲PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015164 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期：現貨PCR試劑盒的(dí)有效期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在適當的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
【質控標準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢測結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該次實驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於可疑樣本(běn)建議復核(hé)一次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增期，則判定為(wéi)陽性，否則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能會導致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的特異性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
瘧(nüè)原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正確(què)結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(復性)可以在較高的溫度下(xià)進(jìn)行，結合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正確度。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析，不一(yī)定要用同位素(sù)，無放射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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