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PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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諾沃克病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒 |
50T |
YS-P015165 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲存溫度下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛好超(chāo)過正常陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯的指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試劑檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能會導致出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與保(bǎo)守性。
諾沃克(kè)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物與模(mó)板的正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結合(hé)及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對(duì)原則的。聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使反應中模板與引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下進行，結合(hé)的特異性大大(dà)增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無放射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需要分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本(běn)如血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論。
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