產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
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氣(qì)單胞(bāo)菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015170 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期一(yī)般為1年，這是指在適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正常陰性(xìng)質控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一次(cì)實驗(yàn)中同時滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸(shū)，保存不當(dāng)或試劑(jì)配製不(bù)準確引起的試劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可(kě)能會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
氣(qì)單(dān)胞(bāo)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的(dí)。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性，使反應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可以在較高的(dí)溫(wēn)度下進行，結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因片(piàn)段也就能保持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶基因區，其特(tè)異性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上進行(háng)變(biàn)性-退火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要分離病毒或細菌(jūn)及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模板。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
