產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商品屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號 |
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氣腫疽梭菌PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015171 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗中同時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則(zé)判定為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當或(huò)試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能會(huì)導致出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
氣腫疽梭菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確(què)結(jié)合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使反應(yīng)中模板與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保持很高的(dí)正確(què)度。再通過(guò)選擇特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的靶基(jī)因區，其特(tè)異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測(cè)模板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不一定(dìng)要用同(tóng)位素(sù)，無放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接(jiē)用臨(lín)床標本如血液，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技術概論。
