產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產品名(míng)稱 | 規格 | 貨號 |
|
侵襲(xí)性(xìng)大(dà)腸杆菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015172 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為1年，這是指(zhǐ)在適當(dāng)的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上要求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判定為陽性，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試劑汙染，樣(yàng)品交叉汙染會出(chū)現假陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存不當或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
侵(qīn)襲性大腸(cháng)杆(gān)菌PCR檢測試劑盒其中引物與模(mó)板的(dí)正確結合(hé)是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合的特異性大(dà)大增加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和(hé)保守性高的靶(bǎ)基因區，其特異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測(cè)模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純度要求低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標本如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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