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PCR檢測試劑(jì)盒
| 產品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號(hào) |
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禽(qín)呼(hū)腸(cháng)孤病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015176 |
儲存(cún)條件:-20℃避光保存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避(bì)光。
有效(xiào)期(qī):一年
貨期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為1年(nián),這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下,產物檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融(róng)。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好超過正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為(wéi)陽性,有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct值應小於(yú)等(děng)於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足,否則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效。
2.可疑:有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可疑(yí)樣本;對(duì)於可疑(yí)樣本建議復核一次,若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期,則判定為陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判定為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無(wú)指數擴增期(qī),Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染,試劑汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現假陽性結果;
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保存(cún)不當或試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的試(shì)劑檢測效(xiào)能下(xià)降,可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。

②鹼基配(pèi)對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng);
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性與保守性(xìng)。
禽(qín)呼(hū)腸孤病毒PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對原則的(dí)。聚合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性,使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物的結合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的溫度(dù)下進(jìn)行,結合的(dí)特(tè)異性大大(dà)增(zēng)加,被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守性高的(dí)靶基(jī)因區,其(qí)特異性程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的,能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞;在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成單位(wèi));在細菌學中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上進行變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反應,一(yī)般在(zài)2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應。擴增產物一般用電泳(yǒng)分析,不一定要用(yòng)同位素(sù),無放射性汙染,易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可直接用臨床標本如血液,體腔(qiāng)液,洗嗽液,毛發(fā),細胞,活PCR技術概論(lùn)。
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