產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號 |
|
犬(quǎn)布(bù)氏杆菌PCR檢測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015184 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍融。
【結(jié)果分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足，否則該次實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本(běn)建議復(fù)核一次，若(ruò)復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配製不準確引起的試劑檢測效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導致出現假陰性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
犬布氏杆菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的正確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般(bān)用電泳(yǒng)分析，不一定要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要分(fēn)離病毒(dú)或細菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概論。
