產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號(hào) |
|
犬鉤(gōu)端螺旋(xuán)體PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015185 |
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這是指在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸擴增部分的試劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣本建議復核(hé)一次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判定為陰性；
3. 陰性：無指數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會出現假陽性結果；
2. 試(shì)劑運輸，保存不(bù)當或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引起的試(shì)劑檢測(cè)效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性(xìng)。
犬鉤端螺(luó)旋體PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合成反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引物的結合(復(fù)性)可以在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進行，結合的特(tè)異(yì)性大大增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能保持很高的正(zhèng)確度。再通(tōng)過選擇特異性和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定要(yào)用同位素，無放射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概論。
