產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
馬皰(pào)疹病毒(dú)型(xíng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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馬(mǎ)皰疹病(bìng)毒型(xíng)PCR檢測試(shì)劑盒 |
Equine Herpesvirus 4 (EHV4)4PCR |
YS-P014164 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一(yī)般為1年，這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分的試劑(jì)一般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽性，有明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上要求(qiú)需在一次實驗中同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視為無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復核一(yī)次(cì)，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽性結果；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能下降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致出(chū)現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
馬皰(pào)疹(zhěn)病毒(dú)型(xíng)PCR檢測(cè)試劑盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與引物的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下進行，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確(què)度。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一定要(yào)用(yòng)同位素，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度要(yào)求低
不需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
