產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 規格 | 貨(huò)號 |
|
沙眼(yǎn)衣(yī)原體PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015243 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般為1年(nián)，這是指在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試劑一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上要求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期，則判定為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當或試劑配製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與保守(shǒu)性。
沙眼衣原體PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的正確(què)結合是(shì)關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引物的結(jié)合(復性(xìng))可以在較高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結合的特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段也(yě)就能(néng)保持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的靶基因區，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放射性汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概論。
