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PCR檢測(cè)試劑盒
| 產品名稱 | 規格 | 貨號(hào) |
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沙眼(yǎn)衣原體(tǐ)和(hé)淋球菌(jūn)PCR聯(lián)合(hé)測(cè)定(dìng)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015244 |
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光保(bǎo)存(cún),避免反(fǎn)復凍融。
運輸:低(dī)溫,避光。
有效期(qī):一(yī)年
貨(huò)期(qī):現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一般為1年(nián),這是指在(zài)適當(dāng)的儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般要貯存於(yú)-20℃下,產物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。

u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾值綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結果應(yīng)為陽(yáng)性,有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī),Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足,否則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
2.可(kě)疑(yí):有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑樣本;對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議復核一次,若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期(qī),則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則判定為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染,試劑(jì)汙染,樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運輸(shū),保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降(jiàng),可能會導致出現假陰性結果(guǒ)。

②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應的忠實性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與保守(shǒu)性。
沙眼衣(yī)原(yuán)體和(hé)淋球(qiú)菌PCR聯(lián)合測(cè)定(dìng)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反應(yīng)中模板與引物(wù)的結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度下進行,結(jié)合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增加(jiā),被(bèi)擴增(zēng)的靶基因片段也就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守性高的靶基(jī)因區,其(qí)特異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細胞;在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位);在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi),一次性(xìng)地將反(fǎn)應液加好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素(sù),無放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分離病毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血液,體腔液,洗嗽液(yè),毛發(fā),細(xì)胞,活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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