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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
| 產品名稱 | 規格 | 貨號(hào) |
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山(shān)羊痘(dòu)病毒PCR檢測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015245 |
儲存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保存(cún),避免反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸:低溫(wēn),避光。
有(yǒu)效期(qī):一年
貨(huò)期:現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián),這是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴增部分的試(shì)劑一般(bān)要貯存於-20℃下(xià),產物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復凍融。

u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫設定在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
2. 陽性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú),否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無效。
2.可疑(yí):有明顯的(dí)指數擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本為可疑(yí)樣本;對於可(kě)疑樣本建議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次,若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),則判定為陽(yáng)性,否(fǒu)則判定(dìng)為陰性;
3. 陰(yīn)性:無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染,試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸,保存不(bù)當或(huò)試劑配製(zhì)不準確引起的試劑檢測(cè)效能下降,可(kě)能(néng)會導致出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。

②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異性與保(bǎo)守性(xìng)。
山羊(yáng)痘(dòu)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引(yǐn)物與模(mó)板的正確(què)結合(hé)是關鍵。引物(wù)與模板的結合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配(pèi)對原則的。聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性,使(shǐ)反應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫度(dù)下進行(háng),結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加(jiā),被擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異性和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區,其特(tè)異性(xìng)程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加(jiā)的,能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo);在病毒(dú)的檢測(cè)中,PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi));在細(xì)菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶,一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應,一(yī)般(bān)在2~4 小時完成擴增反應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析,不(bù)一定要用(yòng)同位(wèi)素(sù),無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病毒(dú)或細菌(jūn)及培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血液,體(tǐ)腔液(yè),洗嗽液,毛發,細胞,活(huó)PCR技術(shù)概論。
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