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產品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
|
嗜(shì)肺(fèi)軍(jūn)團(tuán)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015251 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期一般為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性，有明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否則該次實驗視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
嗜肺(fèi)軍團菌PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可以在較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能保持很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異性和保守(shǒu)性高的靶基(jī)因區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將反應液(yè)加好後，即在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳分析，不一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床標本如(rú)血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
