產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
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嗜(shì)水(shuǐ)氣單(dān)胞菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015252 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反復凍融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結果分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛(gāng)好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一次實驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該次實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染，試劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存不當或試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試劑檢測(cè)效能下降，可能(néng)會導致(zhì)出現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
嗜(shì)水氣(qì)單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物與模板的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼基配對原則的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下進行，結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性和保(bǎo)守性高的靶基因區，其特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生(shēng)成量是以(yǐ)指數(shù)方式增加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應，一般在(zài)2～4 小時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位素，無放(fàng)射性汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接用臨床(chuáng)標本(běn)如血液，體腔液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術概論。
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