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PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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微生物(wù)致病菌PCR快(kuài)速檢測(cè)係列 |
50T |
YS-P015268 |
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的儲存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品的檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣本建議(yì)復核一(yī)次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不當(dāng)或(huò)試劑配製不準確(què)引起的試劑檢(jiǎn)測效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性與(yǔ)保守性。
微生物致病(bìng)菌PCR快(kuài)速檢測係列(liè)其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的正(zhèng)確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫度下(xià)進行，結合的特(tè)異性大大增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段也(yě)就(jiù)能保持很高的正確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保守性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般用電泳分析，不(bù)一定要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如血液，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論。
