產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
豌豆(dòu)內(nèi)源(yuán)基因PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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豌豆內源(yuán)基因PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015267 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一般為(wéi)1年，這(zhè)是指在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試劑一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於等於35；
3. 以上要求需在一次(cì)實(shí)驗中同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣本建議復核一次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則判(pàn)定為陽性，否則判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性與(yǔ)保守性(xìng)。
豌豆內源(yuán)基因(yīn)PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及(jí)引物鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配對原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可(kě)以在較高的(dí)溫度下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特(tè)異性大(dà)大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持(chí)很高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如(rú)血(xiě)液，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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