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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號(hào) |
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小(xiǎo)腸結(jié)腸耶(yé)爾森菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015277 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質控品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次實驗中同時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復核一次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽性，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試劑(jì)配製(zhì)不準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
小腸結(jié)腸耶爾森菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板的正確(què)結合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很高的正確度。再通過選擇特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其特(tè)異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增加的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用電泳分(fēn)析，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病毒(dú)或細菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
