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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨(huò)號 |
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小反(fǎn)芻獸(shòu)疫病(bìng)毒PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015279 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián)，這是指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物檢測(cè)部分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的(dí)檢測結(jié)果應為陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本；對於可疑樣(yàng)本建議復(fù)核(hé)一次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運輸(shū)，保存不當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
小反(fǎn)芻獸疫(yì)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下進行，結合的特異性(xìng)大大增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶基因片段也就能保持很高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過選擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般(bān)用電泳分析(xī)，不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒或細菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
