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PCR檢測試劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規格 | 貨號 |
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魚PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015306 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫，避光。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑(yí)樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配製不準確(què)引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性與保守性(xìng)。
魚PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引物與模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其特異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳分析，不一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床標本如(rú)血液，體腔液，洗嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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